Banca de QUALIFICAÇÃO: JOÃO PEDRO ALVES DAMACENO DO LAGO

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JOÃO PEDRO ALVES DAMACENO DO LAGO
DATA: 15/09/2026
HORA: 14:00
LOCAL: Sala de reunião LAPGENIC
TÍTULO: CRISPR/CAS9 COMO TERAPIA GÊNICA PARA QUEBRA DE QUIMIORRESISTÊNCIA À TEMOZOLOMIDA ATRAVÉS DO KNOCKOUT DO GENE MGMT NA LINHAGEM DE GLIOBLASTOMA HUMANO T98G
PALAVRAS-CHAVES: Glioblastoma, Temozolomida, MGMT, CRISPR/Cas9
PÁGINAS: 96
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Farmácia
RESUMO:

O glioblastoma (GBM) é um dos tumores mais agressivos do sistema nervoso central, apresentando elevada capacidade proliferativa, heterogeneidade molecular, invasão do tecido cerebral, recorrência e resistência ao tratamento. A temozolomida (TMZ) constitui o principal agente quimioterápico utilizado no tratamento do GBM; entretanto, diferentes mecanismos estão associados à quimiorresistência, com destaque para o gene MGMT. Nesse contexto, o trabalho foi desenvolvido em duas abordagens complementares. A primeira corresponde a uma revisão sistemática destinada a reunir e analisar estudos experimentais que utilizaram estratégias baseadas em CRISPR para investigar mecanismos de  2 resistência ou promover sensibilização à TMZ em tumores cerebrais, considerando sistemas CRISPR, alvos moleculares, métodos de entrega e modelos experimentais. A busca resultou em 309 registros, dos quais 259 artigos únicos foram triados e 51 selecionados para leitura do texto completo. A revisão encontra-se em andamento. A segunda abordagem avaliará experimentalmente um sistema CRISPR/Cas9 direcionado ao knockout do gene MGMT na linhagem T98G. O sequenciamento de Sanger identificou duas variantes no gene MGMT, uma sinônima e uma missense, sem associação descrita com perda de função da proteína. O ensaio de viabilidade celular por MTT demonstrou CI₅₀ de 1507 µM para a TMZ, enquanto a citometria de fluxo e os esferoides 3D demonstraram alterações progressivas em resposta ao tratamento. O sgRNA direcionado ao éxon 3 apresentou indels detectáveis pelo ensaio de T7E1, e o pool de células transfectadas apresentou redução da CI₅₀ da TMZ de 1507 para 855,5 µM, o que corresponde a aproximadamente 43% de redução, sugerindo aumento da sensibilidade ao quimioterápico após a edição do MGMT. Entretanto, ainda é necessária a obtenção e caracterização de clones derivados de célula única para estabelecer de forma conclusiva a relação entre o knockout do MGMT e o aumento da sensibilidade à temozolomida. 

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1731057 - JOAO MARCELO DE CASTRO E SOUSA
Externo à Instituição - 019.***.***-43 - ALINE COSTA BASTOS - UFPA
Externo à Instituição - 036.***.***-95 - JULIANA MARA SERPELONI - UEL
Externo à Instituição - 063.***.***-38 - RAYRAN WALTER RAMOS DE SOUSA - UFDPar
Externo à Instituição - 603.***.***-84 - VICTOR ALVES DE OLIVEIRA - ESP-CE