Para a indústria farmacêutica, os medicamentos devem ser comercializados como formulações seguras e terapeuticamente ativas, associado a um controle de qualidade simples, barato e rápido. Um emulgel desenvolvido à base de anfotericina B (AnfB) e manteiga de bacuri (Platonia insignis Mart.), indicado para o tratamento de leishmaniose cutânea, um importante problema de saúde pública no Brasil e no mundo, apresentou-se como uma alternativa potencial para o tratamento dessa doença. Os métodos descritos para doseamento de AnfB: espectrofotometria no Ultravioleta e Visível (UV-Vis) e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), Cromatografia Gasosa (CG), apresentam desvantagens nos quesitos praticidade, rapidez, economia. Nesse sentido, a espectroscopia no infravermelho vem ganhando notoriedade para o controle de qualidade de fármacos, devido as suas vantagens sobre esses métodos convencionais. O objetivo desse trabalho foi desenvolver um método de quantificação do analito AnfB em uma formulação farmacêutica complexa (emulgel), base de manteiga de bacuri (Platonia insignis Mart.), usando a espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier com reflectância total atenuada (IV-TF-RTA). As soluções com padrão de Anfb e KBr foram formuladas para a aquisição de espectros ATR-FTIR, sem preparação dos discos de KBr, comumente usados, com aplicação direta em acessório RTA. Com o modelo univariado aplicado, empregado na banda localizada em 1040 cm-1, obteve-se o coeficiente de determinação (r2) de 0,998. Os limites de detecção e quantificação determinados foram 0,0014 m/m, mg e 0,004 m/m, mg, respectivamente. Realizou-se o estudo de interferência para verificar a influência dos excipientes da formulação. A sobreposição de bandas, apesar de presente, foi contornada com a subtração da contribuição da absorbância decorrente dos excipientes. O estudo mostrou que a espectroscopia ATR-FTIR é uma alternativa viável e potencial para o doseamento de AnfB em formulação farmacêutica complexa.