Banca de DEFESA: MICKAEL LAUDRUP DE SOUSA CAVALCANTE

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MICKAEL LAUDRUP DE SOUSA CAVALCANTE
DATA: 04/04/2025
HORA: 08:30
LOCAL: meet.google.com/yem-bxnu-duj
TÍTULO: Efeito do bloqueio do receptor do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) sobre etapas da metástase mediada pela integrina VLA-4 em células de melanoma murino B16F10
PALAVRAS-CHAVES: câncer. B16F10; VEGFR; α4β1; proliferação; adesão; migração; invasão
PÁGINAS: 154
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Farmacologia
RESUMO:

Os tumores do tipo melanoma têm sido foco constante de estudos para investigação de novas abordagens e alvos terapêuticos, devido ao mau prognóstico associado à metástase e desenvolvimento de resistência à quimioterapia. Neste contexto, destacam-se os receptores VLA-4 e VEGFR, os quais compartilham efetores intracelulares e participam diretamente da disseminação metastática. Dessa forma, este estudo avaliou o efeito do bloqueio do VEGFR sobre a metástase mediada pela integrina VLA-4 em células de melanoma murino B16F10. Estas foram cultivadas em meio RPMI-1640 + FBS 10% e avaliadas inicialmente quanto ao efeito do bloqueio de VEGFR, com sorafenibe, sobre a viabilidade (5 x 10³ células / poço). Pelos achados, os valores de CI₅₀ do bloqueador de VEGFR foram 4,60 µg/mL [4,11 – 5,18] e 2,96 µg/mL [2,67 – 3,29] para, respectivamente, 24h e 72h. A análise da participação de VLA-4 no efeito do bloqueio de VEGFR sobre a viabilidade de células B16F10 foi feita pela incubação destas células, por 48h, com o RNA silenciador [100 nM], para o knockdown de VLA-4, seguido do tratamento, por 24h, com 1/8 – 8x do valor de CI₅₀ do sorafenibe [4,60 µg/mL]. Segundo os resultados, houve um deslocamento da curva concentração-resposta para células B16F10 VLA-4 kd à esquerda da curva para células B16F10. Concernente aos testes funcionais, as células B16F10 e B16F10 VLA-4 kd foram tratadas com sorafenibe [3 µg/mL] ou tripsina [10 mg/mL], como controle positivo, e dissociadas com PBS[1x] + EDTA [0,53 mM], para o plaqueamento de células viáveis após contagem pelo método de exclusão de azul de tripan [0,4%]. Pelos resultados obtidos, houve uma diminuição (p < 0,05) da inibição do sorafenibe sobre a adesão de células B16F10 (2,5 x 10⁴ células / poço) silenciadas para VLA-4, em substrato de fibroblastos L929. De maneira oposta, ocorreu uma potencialização (p < 0,05) da ação inibitória do sorafenibe sobre a adesão de células B16F10 em monocamada de fibroblastos L929 face ao silenciamento de VLA-4, o que não foi observado na adesão destas células em monocamada de células endoteliais SVEC4-10. Na migração de células B16F10 por arranhadura (5 x 104 células / poço) e quimiotaxia (2 x 10⁵ células / poço), apesar do aumento do efeito do sorafenibe (p < 0,05) frente ao knockdown de VLA-4, este continuou similar ao observado para as células B16F10 VLA-4 kd não tratadas. Na transmigração das células B16F10 (5 x 10⁴ células / poço), através da monocamada endotelial, o efeito do bloqueio de VEGFR pareceu independente de VLA-4. Todavia, a redução dos níveis de VLA-4 atenuou a ação do sorafenibe sobre a invasão de células B16F10 (1 x 10⁵ células / poço) em substrato de gelatina [0,2%] e, de forma contrária, potencializou (p < 0,05) a inibição da clonogenicidade de células B16F10 (1 x 10² células / poço) decorrente do bloqueio de VEGFR. Por fim, a redução induzida pelo bloqueio de VEGFR sobre a ativação de AKT e ERK1/2 em células B16F10 foi atenuada (p < 0,05) pelo silenciamento de VLA-4. Em suma, os receptores VEGFR e VLA-4 mostraram-se diretamente envolvidos nas etapas da cascata metastática avaliadas in vitro com células B16F10, porém com um nível diferencial de interação, onde nos ensaios realizados com ligantes canônicos de integrina, houve uma perda do efeito do sorafenibe, enquanto que naqueles essencialmente proliferativos foi possível demonstrar a interação sinérgica de ambos os receptores.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 3107513 - DALTON DITTZ JUNIOR
Externo ao Programa - 2128442 - FELIPE CAVALCANTI CARNEIRO DA SILVA
Externo à Instituição - 967.***.***-72 - ANA JERSIA ARAUJO - UFDPar
Externo à Instituição - 008.***.***-09 - JOSÉ ROBERTO DE OLIVEIRA FERREIRA - UNCISAL