Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MATEUS LIMA ALMEIDA
DATA: 24/03/2026
HORA: 14:00
LOCAL: Núcleo de Pesquisas em Plantas Medicinais- NPPM Bloco 15- Híbrida
TÍTULO: ATIVIDADE ANTIPROLIFERATIVA E INVESTIGAÇÃO DO MECANISMO DE AÇÃO in vitro DO DITERPENO CASEARINA J EM UM MODELO REPRESENTATIVO DE CÂNCER DE MAMA TRIPLO NEGATIVO
PALAVRAS-CHAVES: neurotoxicidade, antineoplásicos, diterpenos, câncer, Salicaceae
PÁGINAS: 85
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Farmacologia
RESUMO:

O câncer de mama triplo negativo (TNBC) é um subtipo agressivo, caracterizado pela ausência de receptores de estrogênio, progesterona e epidérmicos humanos tipo 2 (HER-2), com elevada heterogeneidade molecular, de recorrência precoce e elevada agressividade e opções terapêuticas limitadas. Diante dos desafios da quimioterapia convencional, toxicidade e resistência, os compostos naturais surgem como opções promissoras para a geração de agentes antineoplásicos. Nesse contexto, Casearia sylvestris Sw. (Salicaceae), uma planta presente na lista do RENISUS, nativa da América do Sul e amplamente utilizada na medicina tradicional brasileira, apresenta relevante potencial farmacológico, atribuído principalmente aos diterpenos clerodânicos, seus principais compostos bioativos. Assim, esse estudo investigou a ação citotóxica da Casearina J (Cas J) em tumores de diferentes origens teciduais, detalhando essa atividade na linhagem de carcinoma de mama 4-T1. Para tanto, Cas J foi isolada das folhas de C. sylvestris por extração hidroalcoólica, fracionamento com acetato de etila e cromatografia, sendo identificada por UPLC-UV, ESI-MS e RMN. Ensaios de citotoxicidade foram realizados após 72 h de incubação com Cas J (0.34 - 44.47 µM) em 16 linhagens celulares tumorais e saudáveis (murinas e humanas) pelo ensaio de Alamar Blue™, para determinação da CI50 e do índice de seletividade (IS). Em seguida, sob tratamento com Cas J, células de 4-T1 foram avaliadas quanto à viabilidade pelo método de exclusão de azul de tripan, migração in vitro pelo ensaio de migração (scratch assay), ensaio de formação de colônias, o mecanismo de morte e alterações morfológicas por microscopia de luz e de fluorescência, citotoxicidade e clastogenicidade pelo ensaio do micronúcleo com bloqueio de citocinese, quanto à investigação do envolvimento do estresse oxidativo no mecanismo de ação da Cas J por quantificação dos níveis de espécies reativas de oxigênio intracelular e da modulação antioxidante com N-acetilcisteína (NAC). O composto Cas J demonstrou atividade citotóxica em diferentes tipos histológicos de tumores e células saudáveis testadas com IS superiores a 2 para as linhagens tumorais de sarcoma 180 (2,45 - 11,90), TNBC murino 4-T1 (2,97 - 8,96) e adenocarcinoma de mama humano MCF-7 (3,21 - 9,68) em relação às linhagens normais LUCS-02, HaCaT, C2C12 e MCF-10A. Células 4-T1 tratadas com Cas J mostraram alterações morfológicas dependentes da concentração, com retração citoplasmática, rarefação celular, hipercromasia e núcleos picnóticos desde 0,09 µM até fragmentação nuclear e indicação da formação de corpos apoptóticos em 1,78 µM, cujos dados foram confirmados pela dupla coloração com laranja de acridina e iodeto de propídio, com diminuição da população de células viáveis e aumento de células apoptóticas (p < 0,05). Nessa mesma linha de raciocínio, Cas J reduziu os índices de proliferação celular em testes de ensaio do micronúcleo por bloqueio da citocinese e aumentou a apotose, embora apenas aumento de brotos tenha sido observado (0,90 µM). O aumento na geração de ROS se revelou sugnificante apenas na maior concentração (44,47 µM) e o co-tratamento com NAC reduziu o número de células não viáveis (p < 0,05). Casearina J também inibiu a migração de células 4-T1 ao diminuir o tempo de fechamento da ferida (0,02; 0,09 e 0,18 µM) a partir de 12 h até às 48 h de tratamento, enquanto que a concentração de 0,90 µM reduziu a formação de colônias em torno de 85% (p < 0,05). Assim, o diterpeno tríciclico oxigenado Casearina J mostrou com maior seletividade contra células de câncer de mama MCF-7 e 4-T1, reduziu a viabilidade de células 4-T1, induziu morte celular sugestiva de apoptose, mesmo apresentando baixo potencial clastogênico in vitro e diminuiu a formação de colônias tumorais após 72h de tratamento e a migração celular em concentrações não citotóxicas até 100x menores que seu valor de CI50. A citotoxicidade em 4-T1 foi parcialmente atenuada por NAC, sugerindo o envolvimento de mecanismos oxidativos como mediadores secundários na morte celular. Assim, os diterpenos clerodânicos têm se destacado pela vasta literatura dedicada ao isolamento, à caracterização estrutural e à análise de suas bioatividades, posicionando-os como uma das classes de moléculas terapêuticas mais promissoras para o tratamento do câncer.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - 169.***.***-17 - ANDRÉ GONZAGA DOS SANTOS - UNESP
Interno - 2714919 - DANIEL DIAS RUFINO ARCANJO
Interno - 2950101 - FRANCISCO LEONARDO TORRES LEAL
Presidente - 1638239 - PAULO MICHEL PINHEIRO FERREIRA
Externo à Instituição - 063.***.***-38 - RAYRAN WALTER RAMOS DE SOUSA - AESPI

Cadastrada em: 10/03/2026